ⅠNucleic saueremiAféierung
D'Nukleinsäure ass an Deoxyribonukleinsäure (DNA) a Ribonukleinsäure (RNA) opgedeelt, ënner deenen d'RNA opgedeelt ass an ribosomal RNA (rRNA), Messenger RNA (mRNA) an Transfer RNA (tRNA) no senge verschiddene Funktiounen.DNA ass haaptsächlech am Kär, Mitochondrien a Chloroform konzentréiert, wärend RNA haaptsächlech am Zytoplasma verdeelt ass.Als materiell Basis vum Genausdrock spillt d'Nukleinsäureextraktioun eng extrem wichteg Roll an der molekulare Biologiefuerschung a klinescher molekulare Diagnostik.D'Konzentratioun an d'Rengheet vun der Nukleinsäureextraktioun beaflossen direkt de spéideren PCR, Sequenzéierung, Vektorkonstruktioun, Enzym Verdauung an aner Experimenter.
Ⅱ Nukleinsäure Extraktioun a Reinigungsmethod
① Phenol / Chloroform Extraktioun Method
Phenol / Chloroform Extraktioun ass eng klassesch Method fir DNA Extraktioun, déi haaptsächlech zwee verschidden organesch Léisungsmëttel benotzt fir d'Proben ze behandelen, DNA baséiert Nukleinsäure an der Waasserphase opléisen, Lipiden an der organescher Phase, a Proteinen tëscht den zwou Phasen.Dës Method huet d'Virdeeler vun niddereg Käschten, héich Rengheet a gudden Effekt.D'Nodeeler sinn komplizéiert Operatioun a laang Zäit.
② Trizol Method
Trizol Method ass eng klassesch Method fir RNA Extraktioun.D'Trizol-Methode gëtt an d'wässerlech Phase an d'organesch Phase opgedeelt no der Zentrifugéierung mat Chloroform, an där d'RNA an der wässerlecher Phase opgeléist gëtt, d'wässerlech Phase gëtt an en neit EP-Röhre transferéiert, Nidderschlag gëtt nom Addéiere vun Isopropanol kritt, an dann Ethanolreinigung.Dës Method ass gëeegent fir RNA Extraktioun aus Déieregewebe, Zellen a Bakterien.
③ Zentrifugalkolonne Reinigungsmethod
Zentrifuge Kolonn Offäll Method kann DNA speziell duerch speziell Silicon Matrixentgasung Adsorptioun Material adsorbéieren, iwwerdeems RNS a Protein kann ofgefaangen passéieren, an dann héich Salz niddereg PH benotzen Nukleinsäure ze kombinéieren, niddereg Salz héich PH Wäert elution ze trennen an ze purifizéieren Nukleinsäure.D'Virdeeler sinn héich Offäll Konzentratioun, héich Stabilitéit, kee Besoin fir organesch Léisungsmëttelbad, an niddreg Käschten.Den Nodeel ass datt et Schrëtt fir Schrëtt centrifugéiert muss ginn, méi Operatiounsschrëtt.
④ Magnéitesch Perlen Method
D'Methode vu magnetesche Perlen ass d'Zellgewebesprobe duerch d'Lysat opzedeelen, d'Nukleinsäure an der Probe ze befreien, an dann ginn d'Nukleinsäuremoleküle speziell op der Uewerfläch vun der magnetescher Perle adsorbéiert, wärend Gëftstoffer wéi Proteinen an Zucker am bleiwen. d'Flëssegkeet.Duerch d'Schrëtt vun der Zellgewebe Spaltung, magnetesch Perlebindung mat Nukleinsäure, Nukleinsäurewäschen, Nukleinsäureelutioun, asw., gëtt reng Nukleinsäure endlech kritt.D'Virdeeler sinn einfach Operatioun a kuerz Zäit benotzen, ouni Schrëtt centrifugation.Et huet niddereg technesch Ufuerderunge a kann automatesch a Mass Operatioun realiséieren.Déi spezifesch Kombinatioun vu magnetesche Perle an Nukleinsäure mécht déi extrahéiert Nukleinsäure mat héijer Konzentratioun a Rengheet.Den Nodeel ass datt den aktuelle Maartpräis relativ deier ass.
⑤ Aner Methoden
Zousätzlech zu den uewe genannte véier Methoden ginn et kachend Rëss, konzentréiert Salzmethod, anionesch Detergentmethod, Ultraschallmethod an enzymatesch Method, etc.
Ⅲ Aart vun Nukleinsäure Extraktioun
Foregene huet déi weltgréisste Direct PCR Plattform, Duebelkolonne RNA Isolatioun Plattform (nëmmen DNA + RNA nëmmen).D'Haaptprodukter enthalen DNA / RNA Isolatiounskits, PCR an Direct PCR Reagents molekulare Labo Reagens Serie.
① Total RNA Extraktioun
Total RNA Extraktioun Echantillon enthalen Blutt, Zellen, Déier Stoffer, Planzen, Viren, etc. Héich Rengheet an héich Konzentratioun vun total RNA kann duerch total RNA Extraktioun kritt ginn, déi an RT-PCR benotzt ginn, Chip Analyse, in vitro Iwwersetzung, molekulare Klonen, Dot Blot an aner Experimenter.
Foregene ZesummenhangRNA Isolatioun Kits
Déier Total RNA Isolatioun Kit--Schnell an effizient extrahéiert héich Rengheet an héichqualitativ total RNA aus verschiddenen Déieregewebe.
Zell Total RNA Isolatioun Kit--Héich gereinegt a qualitativ héichwäerteg total RNA kann aus verschiddene kultivéierten Zellen an 11 Minutten kritt ginn.
Plant Total RNA Isolatioun Kit--Extrait séier héichqualitativ total RNA aus Planzenproben mat nidderegem Polysaccharid a Polyphenol Inhalt.
Viral RNA Isolatioun Kit- Schnell isoléieren a purifizéieren viral RNA vu Proben wéi Plasma, Serum, zellfräi Kierperflëssegkeeten an Zellkultursupernatanten.
② Genomesch DNA Extraktioun
Genomesch DNA Extraktioun Echantillon enthalen Buedem, feces, Blutt, Zellen, Déier Stoffer, Planzen, Viren, etc.. Genomic DNA Extraktioun kann an Enzym Verdauung benotzt ginn, DNA Bibliothéik Konstruktioun, PCR, Antikörper Virbereedung, Western blot hybridization Analyse, Gen Chip, héich -Throughput Sequencing an aner Experimenter.
Foregene ZesummenhangDNA Isolatioun Kits
Déieren Tissue DNA Isolatioun Kit--Snelle Extraktioun a Reinigung vu genomesch DNA aus multiple Quellen, wéi Déieregewebe, Zellen, asw.
Blutt DNA Midi Kit (1-5ml)- Schnell purifizéieren héichqualitativ genomesch DNA aus antikoaguléiert Blutt (1-5ml).
Buccal Swab / FTA Card DNA Isolatioun Kit- Schnell purifizéiere qualitativ héichwäerteg genomesch DNA aus buccale Swab / FTA Card Proben.
Plant DNA Isolatioun Kit- Schnell purifizéieren a qualitativ héichwäerteg genomesch DNA aus Planzenproben (inklusiv Polysacchariden a Polyphenol-Planzeproben)
③ Plasmid Extraktioun
Plasmid ass eng Zort kreesfërmeg kleng Molekül DNA an Zellen, wat e gemeinsame Carrier fir DNA Rekombinatioun ass.D'Method vun der Plasmid Extraktioun ass RNA ze läschen, Plasmid vu bakterieller genomesch DNA ze trennen, a Protein an aner Gëftstoffer ze läschen fir relativ pure Plasmid ze kréien.
Allgemeng Plasmid Mini Kit- Schnell purifizéiere qualitativ héichwäerteg Plasmid DNA aus transforméierte Bakterien fir Routine Molekulare Biologie Experimenter wéi Transformatioun an Enzym Verdauung
④ Aner Extraktiounstypen, miRNA Extraktioun, asw.
Déier miRNA Isolatioun Kit- Schnell an effizient extrahéiert kleng RNA Fragmenter vun 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA aus verschiddenen Déieregewebe an Zellen
Ⅳ Ufuerderunge fir d'Nukleinsäure Extraktioun an d'Reinigungsresultats
① Fir d'Integritéit vun der primärer Struktur vun der Nukleinsäure ze garantéieren.
② Reduzéiert d'Interferenz vu Proteinen, Zucker, Lipiden an aner Makromolekülen
③ Et sollt keen organesche Léisungsmëttel oder eng héich Konzentratioun vu Metallionen sinn, déi den Enzym an Nukleinsäureproben hemmen kënnen.
④ RNA an aner Nukleinsäurekontaminatioun sollten eliminéiert ginn wann Dir DNA extrahéiert, a vice versa.
Post Zäit: Nov-24-2022
